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紫外可见分光光度计如何进行校准

  • 更新时间2024-08-27
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  紫外可见分光光度计是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的精密分析仪器,它能够测量样品在紫外和可见光谱区域内的吸收或透射特性。校准是确保分光光度计测量准确性的关键步骤,以下是对于紫外可见分光光度计校准方式的描述:
  1. 选择合适的标准物质
  - 标准溶液:选择与仪器波长范围相匹配的标准溶液,如在紫外区域常用的硝酸钾溶液,在可见区域常用的重铬酸钾溶液。
  - 纯度要求:标准物质应具有高纯度,以减少杂质对校准结果的影响,并确保其稳定性和可追溯性。
  2. 准备标准溶液
  - 准确称量:使用精密天平准确称量所需标准物质,并按照推荐浓度准确配制溶液。
  - 适宜溶剂:选择适宜的溶剂溶解标准物质,确保溶剂对测定无干扰,并保证溶液的稳定性。
  3. 检查仪器性能
  - 光源检查:确保仪器光源稳定,对于使用氘灯和钨灯的分光光度计,检查灯源是否稳定,并确保灯源寿命足够。
  - 光路清洁:检查仪器光路是否清洁,镜片、分光器等光学元件表面无尘埃、污渍。
  4. 波长校准
  - 使用标准灯:利用具有特征发射谱线的标准灯(如汞灯、氘灯),进行波长的准确性校准。
  - 校正偏移:如果检测到波长偏移,应根据仪器说明书调整波长刻度,确保波长读数的准确性。
  5. 光度准确度校准
  - 透光率校准:使用透光率接近100%的样品(如纯净溶剂)进行基线校正,确保透光率读数的准确性。
  - 吸光度校准:使用标准溶液进行吸光度校准,调整仪器的吸光度读数,使其与标准溶液的已知吸光度一致。
  6. 基线稳定性检查
  - 基线漂移:在没有样品的情况下,全波段扫描,检查基线是否平稳,若基线漂移过大,需检查仪器性能。
  - 温度影响:确保仪器所在环境温度稳定,因为温度波动可能导致基线漂移。
  7. 重复性和线性检查
  - 重复性测试:多次测量同一标准溶液,检查测量结果的重复性,确保仪器的测量精度。
  - 线性范围:使用不同浓度的标准溶液,检查仪器在不同浓度下的线性响应,确保仪器在整个测量范围内的线性。
  8. 记录和验证
  - 详细记录:记录校准过程中的所有操作,包括标准溶液的配制、校准结果、仪器参数的调整等。
  - 验证效果:校准后,使用独立来源的标准溶液进行验证,确保校准效果满足测量要求。
  9. 定期再校准
  - 定期执行:根据仪器使用频率和制造商建议,定期进行校准,确保仪器始终处于最佳状态。
  - 遇到问题时:若发现测量结果异常或进行了重大维修,应立即进行再校准。